双硫仑纳米混悬剂的制备及体内外抗乳腺癌研究

编号：YYHY007922

篇名：双硫仑纳米混悬剂的制备及体内外抗乳腺癌研究

作者：季宇彬 刘彪 于润琪 王向涛

关键词： 双硫仑 乳腺癌 纳米混悬剂 抗癌 药效学

机构： 哈尔滨商业大学 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所 黑龙江中医药大学药学院

摘要： 双硫仑(disulfiram, DSF)是一种传统的戒酒药物,最近研究发现其对多种癌症类型均表现出强烈的生长抑制作用,但是水溶性差、在胃肠中不稳定及血浆半衰期短的缺点限制了其药效的发挥。本研究拟将DSF制备成纳米混悬剂(DSF-NSps)来解决此问题。采用超声条件下的反溶剂沉淀法制备DSF-NSps,以纳米粒的粒径、多分散性指数(PDI)、zeta电位和放置稳定性等为指标筛选稳定剂。采用动态光散射法测定粒径、PDI和zeta电位,透射电镜观察纳米粒形态;通过DSF-NSps在不同生理介质中的粒径变化来考察DSF-NSps在介质中稳定性。HPLC测定载药量,用透析的方法测定体外药物释放, MTT比色法测定纳米粒和游离双硫仑的体外细胞毒性,进而用4T1荷瘤小鼠研究纳米粒的体内抗肿瘤药效。所有动物实验符合动物实验伦理学标准,并获得中国医学科学院药用植物研究所实验动物伦理委员会批准。结果表明, SPC (大豆磷脂)/TPGS (生育酚琥珀酸聚乙二醇酯)组合稳定剂为DSF的优良稳定剂,药载比为DSF-SPC-TPGS=24∶20∶4时,制得的DSF-NSps粒径较小且放置较稳定,其载药量为(45.36±2.09)%,平均粒径为175.0±0.75 nm, PDI为0.24±0.07, zeta电位为-14.3 mV,外观呈球形;DSF-NSps在磷酸盐缓冲液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、人工肠液、人工胃液和血浆中均能稳定存在,满足静脉注射及灌胃的要求;体外研究显示纳米粒装载显著提高了DSF在水相体系中的稳定性, DSF-NSps可缓慢释放包封的药物,并能提高DSF对癌细胞的生长抑制作用(纳米粒和游离DSF在48 h的IC50分别为1.07和5.53μg·mL^-1, P<0.01)。在荷瘤小鼠药效实验中, DSF-NSps显示出良好的量效关系,高、中、低剂量的肿瘤抑制率分别为80.22%、75.14%和66.10%,均显著高于阳性药紫杉醇注射液(55.01%, P<0.05);组织分布实验显示DSF-NSps主要分布在肝、脾和肿瘤。综上,将双硫仑制备成纳米粒后有望成�