白术多糖超大介孔二氧化硅纳米颗粒的制备及其黏膜免疫佐剂活性的研究

编号：NMJS09610

篇名：白术多糖超大介孔二氧化硅纳米颗粒的制备及其黏膜免疫佐剂活性的研究

作者：林欣怡1；蒋欣雨1；苏子诺1；王煜灵1；阮诗雨1；洪海龙1；吴佳豪1；伯若楠1,2

关键词： 白术多糖; 超大介孔二氧化硅; 黏膜免疫佐剂; 表征; H9N2灭活病毒;

机构： 1.扬州大学兽医学院2.江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

摘要： 旨在结合白术多糖和超大介孔二氧化硅两者的优势，开发新型中药多糖黏膜免疫佐剂。本研究首先制备白术多糖超大介孔二氧化硅(AMP-UCMS)纳米颗粒并对其进行一系列表征，包括透射电镜、粒径、电势、聚合物分散性指数(polymer dispersity index, PDI)和红外光谱，然后进一步研究口服AMP-UCMS作为H9N2型禽流感灭活病毒的黏膜免疫佐剂活性。试验选取150只雏鸡随机分成6组并进行不同免疫处理，分别为阴性对照(Control)、全灭活病毒(whole inactivated virus, WIV)、WIV+AMP、WIV+UCMS、WIV+AMP-UCMS、市售疫苗(Vaccine),其中各组选取6只雏鸡用H9N2禽流感病毒滴鼻攻毒。通过血凝抑制(HI)试验测定各组鸡血清HI抗体效价；采用ELISA方法检测空肠H9N2型禽流感病毒特异性sIgA抗体水平；利用HE染色观察空肠和肺的组织形态变化；利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定空肠IgA J-chain、pIgR、TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平以及攻毒后鸡的肺组织病毒载量等各项指标。试验结果显示，与Control组相比，WIV+AMP-UCMS组可极显著提高鸡血清HI抗体效价(P<0.000 1)和空肠特异性sIgA抗体水平(P<0.01),并能够极显著降低肺组织病毒载量(P<0.000 1),鸡空肠组织中IgA J-chain(P<0.001)、pIgR(P<0.000 1)、TNF-α和IL-1β(P<0.000 1)的mRNA表达水平都极显著提高，此外还能够增加鸡空肠iIEL数量，降低攻毒后肺组织的损伤。综上表明，白术多糖被成功装载到超大介孔二氧化硅中，AMP-UCMS能够有效诱导鸡的全身免疫和黏膜免疫应答。这些研究结果为新型中药多糖黏膜免疫佐剂在畜禽口服疫苗领域的开发应用提供了参考。