丁香酚纳米脂质体的制备条件优化、表征及其体外抑菌效果

编号：NMJS08914

篇名：丁香酚纳米脂质体的制备条件优化、表征及其体外抑菌效果

作者：许书雅 詹轶雯 魏思敏 田启明 伯若楠 刘明江 李金贵

关键词： 丁香酚纳米脂质体 BBD响应面法 优化 表征 体外抑菌

机构： 扬州大学兽医学院 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

摘要： 为解决丁香酚易挥发、难溶于水和不稳定等问题,将其制备成丁香酚纳米脂质体(ENL),并检测其体外抑菌效果。采用薄膜水合超声法制备ENL,在单因素分析基础上以BBD响应面法优化制备工艺;对其形态、粒径、多分散指数(PDI)、体外释放等进行表征;以微量肉汤稀释法检测ENL对大肠杆菌的抑菌效果。ENL的最佳制备条件为:大豆卵磷脂与胆固醇的质量比5.4∶1、丁香酚浓度1.5%、超声时间10 min,包封率可达到(72.42±0.22)%。平均粒径大小为(203.97±8.66)nm, PDI为0.23±0.03,Zeta电位为(-2.18±0.18)mV,具有较好的分散性。透射电镜下,ENL形态近似球形;ENL中丁香酚的红外光谱特征峰消失,提示丁香酚被成功包裹到脂质体中;24 h内在胃肠模拟液中的累积释放量约为60%。30 d内在4℃和25℃两种储存情况下,ENL平均粒径大小及PDI变化不大,与丁香酚相比,ENL具有更好的稳定性。体外抑菌试验结果表明:ENL的抑菌效果比丁香酚增强2~4倍,其对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.31 mg/mL,该浓度可明显抑制大肠杆菌从生长期到对数期的进程;4 MIC处理4 min可杀灭参考株ATCC25922,10 min可杀灭临床分离耐药株AHM5C23;扫描电镜发现,ENL处理引起菌体发生皱缩和细胞膜破损。优化制备的ENL具有较好的均一性和分散性,方便使用,在胃肠模拟液中缓慢释放,且增强了丁香酚的抑菌效果。