青藤碱PLGA-TPGS纳米粒的制备及人肝癌HepG2细胞对其摄取、被其抑制的作用研究

编号：YYHY00414

篇名：青藤碱PLGA-TPGS纳米粒的制备及人肝癌HepG2细胞对其摄取、被其抑制的作用研究

作者：王洪刚[1] ;高萌[2] ;张成鸿[3] ;徐静[2] ;孙艺平[3] ;徐红[3]

关键词：青藤碱 乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E 纳米粒 HepG2细胞 体外 摄取 生长抑制率

机构： [1]大连医科大学附属第一医院药剂科,辽宁大连116011; [2]大连医科大学药学院,辽宁大连116044; [3]大连医科大学基础医学院,辽宁大连116044

摘要： 目的：制备青藤碱乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E（PLGA-TPGS）纳米粒（SPTN）,研究其被人肝癌HepG2细胞摄取和其对细胞的抑制作用。方法：采用乳化-溶剂挥发法制备以香豆素-6（C6）为荧光标记物的SPTN（SCPTN）和青藤碱PLGA纳米粒（SPN）（SCPN）,检测其粒径、Zeta电位和载药量;通过流式细胞仪研究加入不同抑制剂（叠氮化钠、蔗糖、细胞松弛素B、染料木黄酮、甲基-β-环糊精）和空白对照对SCPTN和SCPN被HepG2细胞摄取的影响;以5-氟尿嘧啶溶液（FS）为阳性对照药,采用水溶性四氮唑（WST-1）法测定10、20、40、80、160μg/ml的SPTN、SPN、青藤碱水溶液（SS）作用于Hep G2细胞24、48、72 h的生长抑制率（IR）。结果：SCPTN和SCPN的平均粒径为（192.1±2.4）、（389.3±2.2）nm,Zeta电位为（-21.5±2.6）、（-13.7±2.3）m V,青藤碱载药量为（9.3±1.7）%、（6.1±1.8）%（n=6）。与空白对照比较,叠氮化钠、蔗糖作用后Hep G2细胞对SCPTN和SCPN的相对摄取率均降低（P〈0.01）,染料木黄酮作用后HepG2细胞对SCPTN的相对摄取率降低（P〈0.05）,其余无明显变化。与SS比较,SPTN、SPN作用后HepG2细胞的IR呈浓度、时间依赖性升高,半数抑制浓度（IC50）降低（P〈0.05或P〈0.01）;与FS比较,仅80μg/ml SPTN作用72 h和160μg/ml SPTN作用48、72 h后HepG2细胞的IR升高（P〈0.05或P〈0.01）,作用72 h的IC50降低（P〈0.05）。结论：成功制得SPTN,其主要通过网格蛋白介导的内吞途径进入细胞,对Hep G2细胞生长具有抑制作用。