5nm金纳米颗粒对大鼠皮质神经元的作用及机制初探

编号：YYHY00401

篇名：5nm金纳米颗粒对大鼠皮质神经元的作用及机制初探

作者：吴玉芸 ;刘正霞 ;郭志睿 ;刘莹 ;鲁翔

关键词：金纳米颗粒 大鼠皮质神经元 细胞凋亡 氧化应激

机构： 南京医科大学第二附属医院老年医学科,江苏南京210011

摘要： 目的 ：探讨直径5 nm的小尺寸金纳米颗粒（gold nanoparticles,GNPs）对大鼠皮质神经元细胞的作用及相关机制。方法：使用硼氢化钠还原法制备GNPs,用透射电镜（TEM）及紫外-可见光光谱（UV-Vis）进行鉴定。用5%牛血清白蛋白（BSA）对GNPs进行包裹提纯后制备成不同浓度（600、1 200、2 400μg/L）的GNPs培养液。采用免疫荧光染色鉴定原代培养的大鼠皮质神经元纯度。体外培养原代大鼠皮质神经元72 h后,以正常培养的神经元为对照组,以不同浓度GNPs溶液孵育48 h后的神经元作为实验组。采用TEM观察GNPs在细胞内的分布;采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;采用TUNEL法检测细胞凋亡;采用丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒检测氧化应激水平。结果：TEM及UV-Vis显示硼氢化钠还原法制备的GNPs呈尺寸均一的球形,在溶液中均匀分散。原代培养的大鼠皮质神经元纯度为（82.0±2.3）%。GNPs主要以聚合体形式分布于胞浆、溶酶体、囊泡中。随着GNPs浓度的增高,细胞活性逐渐降低,尤其1 200和2 400μg/L处理组细胞活力较对照组显著降低（P〈0.05）。TUNEL染色结果显示,随着GNPs浓度的增高,凋亡细胞数逐渐增加,1 200和2 400μg/L处理组细胞凋亡明显,具有显著性差异（P〈0.05）。随着GNPs浓度的增高,细胞内MDA含量逐渐增加,SOD含量逐渐减少,1 200和2 400μg/L处理组与对照组相比MDA含量显著升高,SOD含量显著降低（P〈0.05）。结论：5 nm GNPs能降低大鼠皮质神经元的细胞活力,促进其凋亡,其机制可能与氧化应激损伤相关。