基于酶辅助循环放大和银纳米簇技术构建荧光传感器用于MicroRNA的检测

编号：SBJS00622

篇名：基于酶辅助循环放大和银纳米簇技术构建荧光传感器用于MicroRNA的检测

作者：刘景荣[1] ;潘云苓[1] ;赵燕苹[2] ;陈梅[2] ;夏垚坤[2] ;兰建明[2] ;韩志钟[2] ;吴芳[2] ;陈敬华[2] ;李春艳[2]

关键词：磁珠 双链特异性核酸酶 银纳米簇 MIR-21 荧光生物传感器

机构： [1]福州市第一医院中西医结合肿瘤科,福建福州350009; [2]福建医科大学药学院,福建福州350108

摘要： 基于双链特异性核酸酶（Duplex-specific nuclease,DSN）选择性切割DNA单链和DNA保护的银纳米簇的特性,建立了一种新型的荧光传感器用于MicroRNA（MiR-21）的高灵敏检测。当MiR-21存在时,与Cp杂交形成DNA/RNA双链结构,此时在DSN的水解下,释放出探针DNA部分片段和完整的MiR-21。释放出来的MiR-21可再次发生与Cp杂交、DSN酶切等反应,如此反复,可实现一条MiR-21分子与多条探针杂交、酶切的循环过程。经磁分离,上清液中的探针DNA部分片段与Ag＋结合并在硼氢化钠（Na BH4）的还原下产生银簇,检测到较强的荧光信号。相反,当MiR-21不存在时,DSN对单链探针无酶切作用,不能水解Cp,经磁分离,上清液中检测不到荧光信号。在最佳条件下,该传感器检测MiR-21的线性范围为50 fmol/L~10 pmol/L,检测限达6 fmol/L,而且具有较好的选择性,有望用于临床实际样本中微量MiR-21的检测。