壳聚糖-空肠弯曲菌外膜黏附蛋白PEB1核酸疫苗纳米粒子的制备

编号：CPJS04709

篇名：壳聚糖-空肠弯曲菌外膜黏附蛋白PEB1核酸疫苗纳米粒子的制备

作者：李宝栋 ;刘琳琳

关键词：空肠弯曲菌 壳聚糖 纳米粒子 黏附蛋白

机构： 山东医学高等专科学校医学检验系

摘要： 目的研究复凝法制备壳聚糖包裹PEB1纳米粒子的优化条件,并初步探讨其在动物体内的缓释作用。方法雌性清洁级Balb/c小鼠40只,分4组,皮下注射的方式免疫接种。A组:PBS对照组(每只小鼠注射200μl PBS);B组:空白质粒组(每只小鼠注射20μg空白质粒);C组:重组质粒组(每只小鼠注射20μg DNAPEB1);D组:纳米粒子组(每只小鼠注射100μg含20μg DNAPEB1的纳米粒子)。考虑单因素N/P比值、硫酸钠、酸碱度、温度和DNAPEB1浓度对纳米粒子粒径的影响,透射电子显微镜下观察形态;测量纳米粒子粒径和包封率。分组免疫小鼠,检测小鼠血清中抗PEB1抗体含量。结果制备纳米粒子的最适条件为:N/P=5、DNA浓度为100μg/ml、p H=5.5、Na2SO4浓度为0.01 mol/L、水浴温度55℃。扫描电镜图片显示纳米粒子平均粒径在(300±23)nm左右,包封率为(91.23±3.24)%。0~10周重组质粒组抗体水平高于纳米粒子组,12周两组水平相差不大,但14、16周,纳米粒子组水平显著高于重组质粒组。结论 CS-DNAPEB1核酸纳米粒子在小鼠体内对核酸疫苗起到了很好的缓释作用。