纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响

编号：YYHY00177

篇名：纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响

作者：李维杰； 周新丽； 刘宝林； 戴建军； 吕福扣； 张德福； 徐利

关键词：纳米微粒； 卵母细胞； 低温保存； 发育率

机构： 上海理工大学生物热科学研究所； 上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室

摘要： 纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少。本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵母细胞,使用形态观察和荧光染色的方法,研究其对细胞存活率和发育率的影响。结果显示在实验浓度范围内,HA较其它纳米颗粒对猪卵母细胞的毒性低,当浓度低于0.5%时,细胞发育率为100%;低温保护剂中添加0.1%HA纳米颗粒,发育率比其它组显著提高,可以达到22%,且HA的粒径对结果影响不大;当低温保护剂中添加0.05%粒径为60 nm的HA颗粒时,卵母细胞冷冻复温后发育率会进一步从14.7%提高达到30.4%。在低温保护剂中添加适宜浓度的HA纳米颗粒,可以减少复温过程中的重结晶现象,促进细胞的冷冻存活率和发育率,保存效果与浓度相关,而与纳米颗粒的粒径关系不大。