编号:YYHY007826
篇名:纳米氧化硅对RAW264.7细胞的DNA损伤作用
作者:杨红 ;吴秋云 ;劳灿山 ;李明月 ;李文超
关键词: 纳米SIO2 RAW264.7细胞 自由基 遗传毒性 单细胞凝胶电泳
机构: 东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室,江苏南京210009
摘要: 目的:研究纳米氧化硅(SiO2)对小鼠RAW264.7细胞的DNA损伤作用,探讨其可能的毒作用机制。方法:分别采用浓度为31.25、125、500μg/m L的两种纳米SiO2(平均粒径分别为20、60 nm)和500μg/m L的微米SiO2粒子悬液对RAW264.7细胞染毒24 h,彗星试验检测细胞DNA单链断裂情况,CASP软件分析彗星图像,观察指标为彗星率(r(彗星))、尾长(TL)、尾部DNA百分率(r(尾部DNA))和OT尾矩(OTM);分别用硝酸还原酶法、TBA法、Fenton法、黄嘌呤氧化酸法、钼酸法、考马斯亮兰法测定各组染毒细胞匀浆上清液中细胞氧化应激指标丙二醛(MDA)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2)、过氧化氢(H2 O2)、一氧化氮(NO)和蛋白含量。结果:与阴性对照组比较,500μg/m L微米SiO2染毒组和125、500μg/m L的两种纳米SiO2染毒RAW264.7细胞时,r(彗星)、TL、r(尾部DNA)、OTM均升高(P〈0.01);且500μg/m L微米SiO2组的r(彗星)、r(尾部DNA)、OTM高于同浓度两个纳米SiO2组(P〈0.01)。两种纳米SiO2和微米SiO2染毒细胞内脂质过氧化产物MDA、OH、O2、NO及H2O2的水平均高于阴性对照组(P〈0.01)。结论:两种纳米SiO2与微米SiO2均可引起RAW264.7细胞DNA断裂和氧化损伤,氧化应激自由基的大量产生在DNA损伤过程中可能起到一定的作用。