低频超声联合靶向纳米微泡介导siRNA转染肝癌细胞的实验研究

编号：YYHY00780

篇名：低频超声联合靶向纳米微泡介导siRNA转染肝癌细胞的实验研究

作者：吴博林[1] ;程文[1] ;乔强[2] ;韩雪[3] ;荆慧[3] ;张颢[3] ;梁宏健[3]

关键词： 肝细胞癌 纳米微泡 低频超声 SIRNA 声功率

机构： [1]哈尔滨医科大学附属肿瘤医院超声科,黑龙江哈尔滨150081; [2]哈尔滨工业大学生命科学与技术学院,黑龙江哈尔滨150001; [3]不详,黑龙江哈尔滨150001;

摘要： 目的探讨低频超声联合靶向纳米微泡介导的NET-1 siRNA转染人肝癌细胞株HepG 2的最佳输出声功率。方法 1）以磷脂复合物为原料、以半乳糖苷化多聚赖氨酸为靶向配体,利用薄膜水化法配合机械震荡法制备靶向纳米微泡,利用生物素-亲和素系统,将NET-1 siRNA与靶向纳米微泡偶联,制备成肝癌靶向载NET-1siRNA纳米微泡;2）采用CGZZ型低频超声基因转染治疗仪,频率为1.00MHz,单路晶片输出声功率在0.11-3.5W,占空比50%;3）将HepG 2细胞分别接种在培养板中,随机分为6组进行低频超声辐照实验;4）以MTT法检测细胞增殖情况;进行Quantitative Realtime PCR检测NET-1 mRNA表达情况;Western Blot法检测NET-1蛋白的表达。结果 C组、D组、E组和F组的细胞增殖能力与A组比较细胞增殖显著受到抑制（P〈0.05）。C组、D组、E组和F组的细胞增殖在转染后48h分别抑制了54.39%、24.66%、42.49%和63.39%。NET-1mRNA表达抑制率各组间差异有统计学意义（P〈0.05）,D组NET-1 mRNA表达抑制率较其余组明显提高（P〈0.05）。Western Blot电泳结果显示D组的条带表达最弱、范围最小,D组NET-1蛋白表达抑制率92.81%,与同期的B组（26.45%）、C组（43.39%）、F组（25.14%）比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论低频超声联合靶向纳米微泡能有效促进NET-1 siRNA对肝癌细胞的转染,并抑制肝癌细胞的增殖。