叶酸偶联紫杉醇纳米粒的制备及其生物效应研究

编号：CPJS05673

篇名：叶酸偶联紫杉醇纳米粒的制备及其生物效应研究

作者：胡晓丹 ;徐荣 ;袁海龙 ;吴燕 ;张福成

关键词： 紫杉醇 纳米粒 叶酸 MCF-7细胞 靶向性

机构： 空军总医院药学部,北京100142

摘要： 目的以叶酸修饰的生物可降解材料乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA-PEG-FA）为载体,构建叶酸偶联紫杉醇纳米粒〔PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs〕并进行评价。研究其对MCF-7细胞的效应并初步探讨其靶向作用机制。方法乳化分散法制备PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs,并对纳米粒的形态、粒径、Zeta电位、包封率及载药量进行评价;同法制备无叶酸偶联的紫杉醇纳米粒〔PLGA-PEG（PTX）-NPs〕,分别用荧光物质FITC标记,应用荧光显微镜观察其对MCF-7细胞和A549细胞的靶向作用,以及游离叶酸对PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs的干扰作用;MTT法观察PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs、PLGA-PEG（PTX）-NPs对MCF-7细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果制备的PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs为均匀球形粒子,粒径为（88.2±6.7）nm,Zeta电位为（56.5±4.2）mV,包封率为（92.96±0.16）%,载药量为（4.84±0.10）%。与PLGA-PEG（PTX）-NPs相比,PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs能更有效的被MCF-7细胞吞噬（P〈0.05）;PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs、PLGA-PEG（PTX）-NPs对A549细胞无明显靶向作用;培养基中加入游离叶酸干扰了PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs的靶向性。MTT法测得PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs抑制MCF-7细胞生长的IC50值（10.72μg·ml~（-1））明显低于PLGAPEG（PTX）-NPs组（17.41μg·ml~（-1）,P〈0.05）,紫杉醇浓度在1~15μg·ml~（-1）时,PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs组的生长抑制率在24h明显高于PLGA-PEG（PTX）-NPs组（P〈0.05）,紫杉醇浓度达到20μg·ml~（-1）时,两组无显著性差异。PLGA-PEG（PTX）-NPs组的48h细胞凋亡率（87.04%）明显高于PLGA-PEG（PTX）-NPs组（64.14%）。结论制备的PLGA-PEG-FA（PTX）-NPs能够靶向抑制MCF-7细胞增殖并促进其凋亡,其靶向性可能是由叶酸受体介导的。