姜黄素mPEG-PLGA纳米粒对香烟提取物刺激巨噬细胞RAW264.7所致激素抵抗现象逆转作用的研究

编号：YYHY00420

篇名：姜黄素mPEG-PLGA纳米粒对香烟提取物刺激巨噬细胞RAW264.7所致激素抵抗现象逆转作用的研究

作者：王帝 ;崔志磊 ;郭雪君

关键词：姜黄素 激素抵抗 纳米粒子 共聚物

机构： 上海交通大学医学院附属新华医院呼吸科,上海200092

摘要： 目的制备以单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物（mPEG-PLGA）为载体的姜黄素纳米粒（CUR-NPs）,探讨姜黄素（CUR）和CUR-NPs逆转香烟提取物（CSE）暴露所致的激素抵抗现象,比较CUR-NPs和CUR生物学作用的差异。方法采用乳化溶剂挥发法制备CUR-NPs,激光粒度测定仪和透射电子显微镜分别对CUR-NPs的粒径分布和形貌进行表征。脂多糖（LPS）刺激巨噬细胞RAW264.7布地奈德（BUD）（10^-10-10^-5mol/L）干预。LPS＋CSE刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD（10^-10-10^-5mol/L）、CUR（10^-10-10^-5mol/L）、CUR（10^-7mol/L）＋BUD（10^-9-10^-5mol/L）、CUR（10^-9-10^-5mol/L）＋BUD（10^-7mol/L）、CUR-NPs（10^-9-10^-5mol/L）＋BUD（10^-7mol/L）干预,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测巨噬细胞RAW264.7所分泌的IL-8。CES刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD（10^-7mol/L）、CUR（10^-7、10^-6mol/L）和CUR-NPs（10^-7、10^-6mol/L）干预,实时定量PCR检测细胞中组蛋白去乙酰化酶2（HDAC2）mRNA的表达,蛋白免疫印迹（Western blot）检测细胞中HDAC2蛋白的表达。共聚焦显微镜检测巨噬细胞RAW264.7对CUR和CUR-NPs内CUR的摄取量。结果 CUR-NPs外观呈圆形或类圆形,平均粒径为（356.4±146.6）nm。与LPS刺激相比,LPS＋CSE共刺激时BUD（10^-10-10^-5mol/L）对IL-8分泌的最大抑制率显著降低（P〈0.05）,半数抑制浓度（IC50）显著增高（P〈0.05）。LPS＋CSE共刺激时,与BUD（10^-10-10^-5mol/L）组相比,CUR（10^-7mol/L）＋BUD（10^-9-10^-5mol/L）组BUD对IL-8分泌的最大抑制率显著增高（P〈0.05）,IC50显著降低（P〈0.05）。在LPS＋CSE共刺激,CUR和CUR-NPs浓度梯度同为10^-9、10-（-8）和10^-7mol/L时,CUR-NPs＋BUD（10^-7mol/L）组对IL-8分泌的抑制率显著高于CUR＋BUD（10^-7mol/L）组（P〈0.05）。CSE刺激后细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著降低（P〈0.05）;与CSE组相比,CUR（10^-7、10^-6mol/L）组及CUR-NPs（10^-7、10^-6mol/L）组细胞中HDAC2