编号:YYHY00264
篇名:Nrf-2在纳米二氧化硅致人支气管上皮细胞氧化损伤中的作用
作者:范玉兰; 陶功华; 肖萍; 龚春梅; 洪新宇; 帅怡; 郑卫东; 孙静秋;
关键词:核因子E2相关因子2; 纳米二氧化硅; 人支气管上皮细胞; 氧化应激; 损伤;
机构: 上海市疾病预防控制中心毒性评价科; 深圳市慢性病防治中心分子生物室;
摘要: [目的]探讨核因子E2相关因子2(Nrf-2)在纳米二氧化硅(nano-SiO2)致人支气管上皮细胞(16HBE)氧化应激损伤中的作用。[方法]分别以终浓度为1.0、2.5、5.0、10.0、25.0和50.0μg/mL nano-SiO2处理人支气管上皮细胞24 h,检测细胞活性。根据检测结果,确定本实验nano-SiO2(粒径15 mm)的暴露浓度为2.5、5.0和10.0μg/mL,分别设定为低、中、高浓度组。检测各暴露浓度组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激相关指标。Western Blotting检测细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2的表达水平,同时采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Nrf-2基因mRNA表达水平。[结果]中、高浓度nano-SiO2组16HBE胞内ROS水平明显增高(P<0.01),同时T-SOD和GSH-Px含量降低(P<0.05);各浓度nano-SiO2组16HBE胞内MDA含量均明显增高(P<0.05)。与对照组相比,随着nano-SiO2暴露浓度的增高,细胞总Nrf-2蛋白和Nrf-2基因的表达水平呈先增高后降低的趋势,而核内Nrf-2蛋白表达水平均明显增高。[结论]15 nm粒径的SiO2可诱导人支气管上皮细胞发生氧化应激性损伤,而Nrf-2的激活和核转位在调节细胞内氧化-抗氧化体系中起重要作用。